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如何進(jìn)行培養(yǎng)基滅菌

更新時(shí)間:2017-07-14      點(diǎn)擊次數(shù):4188

  在發(fā)酵過程中,培養(yǎng)基滅菌主要有以下幾個(gè)原因:如不滅菌,會(huì)使生物反應(yīng)
的基質(zhì)或產(chǎn)物,因雜菌的消耗而損失,造成生產(chǎn)能力的下降;雜菌也會(huì)產(chǎn)生代謝
產(chǎn)物,這就使產(chǎn)物的提取更加困難,造成得率降低,產(chǎn)品質(zhì)量下降;雜菌大量繁
殖后,會(huì)改變反應(yīng)液的 pH 值,使反應(yīng)異常;有些雜菌會(huì)分解產(chǎn)物,使生產(chǎn)失敗;
如果發(fā)生噬菌體污染,生產(chǎn)菌細(xì)胞將被裂解,使生產(chǎn)失敗。怎樣進(jìn)行培養(yǎng)基滅菌?
 濕熱滅菌
 培養(yǎng)基滅菌大多數(shù)用濕熱滅菌。衡量熱滅菌的指標(biāo)很多,zui常用的是“熱死
時(shí)間”,即在限定的溫度下殺死原有微生物中一定比例所需的持續(xù)時(shí)間。影響熱
滅菌的溫度和時(shí)間的因素很多,包括:微生物種類、性質(zhì)、濃度和培養(yǎng)基的性質(zhì)、
濃度等。
 (1)連續(xù)滅菌
 連續(xù)滅菌也叫連消,其溫度一般以 126~132 ℃為宜,總蒸汽壓力要求達(dá)到
0.044~0.049 MPa 以上。培養(yǎng)基采用連續(xù)滅菌時(shí),需在培養(yǎng)基進(jìn)入發(fā)酵罐前,
直接用蒸汽進(jìn)行空罐滅菌(空消),用無菌空氣保壓,待培養(yǎng)基流入罐后,開始冷
卻。滅菌時(shí)對(duì)培養(yǎng)基的加熱可采用各種加熱器。培養(yǎng)基的冷卻方式有噴淋冷卻式、
真空冷卻式、薄板換熱器式幾種方式,其過程均包括加熱、維持和冷卻。
 (2)間歇滅菌
 間歇滅菌即實(shí)消,是在每批培養(yǎng)基全部流入發(fā)酵罐后,就在罐內(nèi)通入蒸汽加
熱至滅菌溫度,維持一定時(shí)間,再冷卻到接種溫度。實(shí)罐滅菌時(shí),發(fā)酵罐與培養(yǎng)
基一起滅菌。
 其他滅菌設(shè)備一般采用蒸汽滅菌,如設(shè)備十分耐壓,則可采用較高的溫度,
但必須注意設(shè)備內(nèi)部的凹處及露出的小配管等蒸汽不能到達(dá)的部位。
 高壓蒸汽滅菌
 高壓蒸汽滅菌適合于耐高溫培養(yǎng)基、接種器械和蒸餾水的滅菌。培養(yǎng)基在制
備過程中混入各種雜菌,分裝后應(yīng)立即滅菌,至少應(yīng)在 24h 內(nèi)完成滅菌工作。滅
菌時(shí)一般是在 0.105MPa 壓力下,溫度 121℃時(shí),滅菌 15~30min 即可。消毒時(shí)間
不宜過長(zhǎng),也不能超過規(guī)定的壓力范圍,否則有機(jī)物質(zhì)特別是維生素類物質(zhì)就會(huì)
在高溫下分解,失去營(yíng)養(yǎng)作用,也會(huì)使培養(yǎng)基變質(zhì)、變色,甚至難以凝固

 

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