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干粉培養(yǎng)基采用了哪些技術(shù)?

更新時間:2019-04-25      點擊次數(shù):1639
   干粉培養(yǎng)基是微生物試驗的基礎(chǔ),直接影響微生物試驗結(jié)果。適宜的培養(yǎng)基制備方法,貯藏條件和質(zhì)量控制試驗是提供培養(yǎng)基的保證。
 
  微生物實驗室使用的干粉培養(yǎng)基可按處方配制,也可使用按處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基。在制備時,應(yīng)選擇質(zhì)量符合要求的脫水培養(yǎng)基或按單獨配方組分進行配制。(應(yīng)附有處方和使用說明,配制時應(yīng)按使用說明上的要求操作以確保質(zhì)量符合要求,結(jié)塊或顏色發(fā)生改變的脫水培養(yǎng)基不得使用。)
 
  干粉培養(yǎng)基或單獨配方組分應(yīng)在適當(dāng)?shù)臈l件下貯藏,如低溫,干燥和避光,所用的容器應(yīng)密封,尤其是盛放的容器。商品化的成品培養(yǎng)基除了應(yīng)附有處方和使用說明外,還應(yīng)注明有效期,貯藏條件,適用性檢査試驗的質(zhì)控菌和用途。為保證質(zhì)量的穩(wěn)定可靠,各脫水培養(yǎng)基或各配方組分應(yīng)準(zhǔn)確稱量,并要求有一定的度。
 
  配制常用的溶劑是純化水。應(yīng)記錄各稱量物的重量和水的使用量。
 
  配制所用容器不得影響培養(yǎng)基質(zhì)量,一般為玻璃容器。配制所用的容器和配套器具應(yīng)潔凈,可用純化水沖洗以消除清潔劑和外來物質(zhì)的殘留。對熱敏感的培養(yǎng)基如糖發(fā)酵培養(yǎng)基其分裝容器一般應(yīng)預(yù)先進行滅菌,保證無菌性。
 
  干粉培養(yǎng)基應(yīng)*溶解于水中,再行分裝與滅菌。配制時若需要加熱助溶,應(yīng)注意不要過度加熱,避免培養(yǎng)基顏色變深。如需要添加其他組分時,加人后應(yīng)充分混勻。培養(yǎng)基滅菌應(yīng)按照生產(chǎn)商提供或使用者驗證的參數(shù)進行。商品化的成品培養(yǎng)基必須附有所用滅菌方法的資料。
 
  滅菌一般采用濕熱滅菌技術(shù),干粉培養(yǎng)基可采用薄膜過濾除菌。
 
  干粉培養(yǎng)基若采用不適當(dāng)?shù)募訜岷蜏缇鷹l件,有可能引起顏色變化,透明度降低,瓊脂凝固力或p H 值的改變 .因此,培養(yǎng)基應(yīng)采用驗證的滅菌程序滅菌,滅菌方法和條件,應(yīng)通過無菌性試驗和促生長試驗進行驗證。此外,對髙壓滅菌器的蒸汽循環(huán)系統(tǒng)也要加以驗證,以保證在一定裝載方式下的正常熱分布。溫度緩慢上升的高壓滅菌器可能導(dǎo)致培養(yǎng)基的過熱,過度滅菌可能會破壞絕大多數(shù)的細菌和真菌培養(yǎng)基促生長的質(zhì)量。干粉培養(yǎng)基的容積和裝載方式也將影響加熱的速度。因此,應(yīng)根據(jù)滅菌培養(yǎng)基的特性,進行全面的滅菌程序驗證。應(yīng)確定每批培養(yǎng)基滅菌后的p H 值(冷卻至室溫25℃測定)。如果處方中未列出p H 值的范圍,除非經(jīng)驗證表明培養(yǎng)基的PH值允許的變化范圍很寬,否則,p H 值的范圍不能超過規(guī)定值± 0 .2.
 
  制成平板或分裝于試管的干粉培養(yǎng)基應(yīng)進行下列檢查:容器和蓋子不得破裂,裝量應(yīng)相同,盡量避免形成氣泡,固體培養(yǎng)基表面不得產(chǎn)生裂縫或漣漪,在冷藏溫度下不得形成結(jié)晶,不得污染微生物等。應(yīng)檢查和記錄批數(shù)量,有效期及無菌檢查。
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