在配制培養(yǎng)基時(shí),
干粉培養(yǎng)基應(yīng)選擇合適的脫水培養(yǎng)基或單獨(dú)的配方。脫水介質(zhì)應(yīng)附有使用處方和使用說(shuō)明,并應(yīng)按照使用說(shuō)明配制,以確保介質(zhì)質(zhì)量符合要求。脫水介質(zhì)應(yīng)使用無(wú)結(jié)塊或顏色變化。干粉介質(zhì)或單個(gè)配方成分應(yīng)儲(chǔ)存在適當(dāng)?shù)臈l件下,如低溫、干燥和黑暗,所有容器應(yīng)密封,特別是含有脫水介質(zhì)的容器。除處方和使用說(shuō)明外,商業(yè)成品培養(yǎng)基還應(yīng)注明有效期、貯存條件、質(zhì)量控制菌和使用適宜性檢驗(yàn)試驗(yàn)。
干粉培養(yǎng)基是微生物檢測(cè)的基礎(chǔ),直接影響微生物檢測(cè)的結(jié)果。適宜的制備方法、貯存條件和質(zhì)量控制試驗(yàn)是提供培養(yǎng)基的保證。
微生物實(shí)驗(yàn)室使用的干粉培養(yǎng)基可以按照處方配制,也可以按照處方配制處方脫水培養(yǎng)基。在制備過(guò)程中,應(yīng)選擇合適的脫水介質(zhì)或單獨(dú)的配方。(附處方及說(shuō)明書(shū),按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行配制,確保質(zhì)量符合要求。不得使用集總脫水或變色脫水介質(zhì)。)
干粉介質(zhì)或單個(gè)配方成分應(yīng)儲(chǔ)存在適當(dāng)?shù)臈l件下,如低溫、干燥和黑暗,使用的容器應(yīng)密封,特別是在容器中。除處方和使用說(shuō)明外,商業(yè)成品培養(yǎng)基還應(yīng)注明有效期、貯存條件、質(zhì)量控制菌和使用適宜性試驗(yàn)。為了保證質(zhì)量的穩(wěn)定性和可靠性,每一種脫水介質(zhì)或每一種配方成分都應(yīng)準(zhǔn)確稱量,并要求具有一定的準(zhǔn)確度。
為了保證培養(yǎng)基質(zhì)量的穩(wěn)定可靠,每一種脫水培養(yǎng)基或每一配方成分都要準(zhǔn)確稱量,并要求一定的準(zhǔn)確度。介質(zhì)制備中常用的溶劑是純凈水。在特殊情況下,可能需要去離子水和蒸餾水。每個(gè)重量的重量和用水量都應(yīng)該記錄下來(lái)。培養(yǎng)基制備過(guò)程中使用的容器及附件應(yīng)保持清潔,玻璃器皿應(yīng)用純凈水沖洗,去除洗滌劑殘留及異物。對(duì)于熱敏性培養(yǎng)基,如糖發(fā)酵培養(yǎng)基,其容器應(yīng)提前消毒,以保證培養(yǎng)基的無(wú)菌性。
脫水后的培養(yǎng)基應(yīng)*溶解在水中,再進(jìn)行分離消毒。如果需要加熱制劑以助溶解,應(yīng)注意不要過(guò)熱,避免介質(zhì)變色。如果需要添加其他組,請(qǐng)將它們*混合。培養(yǎng)基應(yīng)按廠家提供的參數(shù)消毒或經(jīng)用戶驗(yàn)證。商業(yè)成品媒體必須附有滅菌方法的信息。培養(yǎng)基的滅菌一般采用濕熱滅菌技術(shù),特殊培養(yǎng)基可采用薄膜過(guò)濾滅菌。
干粉培養(yǎng)基的滅菌不當(dāng)可能導(dǎo)致顏色變化,透明度,減少或更改在瓊脂凝固或博士因此,培養(yǎng)基應(yīng)由驗(yàn)證殺菌消毒過(guò)程,以及培養(yǎng)基的滅菌方法和條件應(yīng)由無(wú)菌驗(yàn)證試驗(yàn)和促生長(zhǎng)試驗(yàn)。此外,還應(yīng)對(duì)高壓蒸汽分離器的蒸汽循環(huán)系統(tǒng)進(jìn)行驗(yàn)證,以確保在一定的加載模式下熱分布正常。緩慢上升的高壓釜可能會(huì)導(dǎo)致干粉培養(yǎng)基過(guò)熱,過(guò)度滅菌可能會(huì)破壞大多數(shù)生長(zhǎng)用的細(xì)菌和真菌培養(yǎng)基的質(zhì)量。滅菌器中介質(zhì)的體積和負(fù)荷也會(huì)影響加熱速度。因此,應(yīng)根據(jù)殺菌介質(zhì)的特點(diǎn),確定一套綜合的殺菌程序。
自配介質(zhì)應(yīng)標(biāo)明名稱、批號(hào)、制備日期,并在已證明的條件下保存。商業(yè)成品的標(biāo)簽應(yīng)當(dāng)標(biāo)明該商品的品名、批號(hào)、生產(chǎn)日期、有效期和有關(guān)特性。制造商和用戶應(yīng)按照操作說(shuō)明的要求保存介質(zhì)。使用的儲(chǔ)運(yùn)條件應(yīng)使成品介質(zhì)失水,并提供機(jī)械保護(hù)。
如果培養(yǎng)基在滅菌后儲(chǔ)存在高壓釜中,可能會(huì)影響其質(zhì)量。一般不建議使用這種存儲(chǔ)方法。瓊脂培養(yǎng)基不應(yīng)儲(chǔ)存在0℃或以下,因?yàn)槔鋬隹赡軙?huì)破壞凝膠的性能。
文化媒體應(yīng)遠(yuǎn)離陽(yáng)光。長(zhǎng)期儲(chǔ)存時(shí),應(yīng)置于密閉容器內(nèi),以防失水。瓊脂板可以使用了。如存放在冰箱內(nèi),應(yīng)密封不超過(guò)一周。如果儲(chǔ)存時(shí)間較長(zhǎng),應(yīng)通過(guò)驗(yàn)證來(lái)確定保質(zhì)期。
滅菌后的固體培養(yǎng)基只允許再解凍一次,以免培養(yǎng)基質(zhì)量惡化或因加熱過(guò)度而造成微生物污染。介質(zhì)的重熔通常通過(guò)水浴加熱或循環(huán)蒸汽進(jìn)行。假如使用微波爐,應(yīng)避免介質(zhì)過(guò)熱和水分蒸發(fā),更要注重安全。溶化后的培養(yǎng)基應(yīng)置于45 ~ 50℃的水浴中浸泡不超過(guò)8小時(shí)。在傾倒培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)將培養(yǎng)基容器表面的水擦干,以免培養(yǎng)基外壁的水滴進(jìn)入培養(yǎng)基造成污染。
使用過(guò)的干粉介質(zhì)(包括無(wú)效介質(zhì)),按照國(guó)家有關(guān)污染廢物處理的規(guī)定處理。
干粉培養(yǎng)基質(zhì)量控制試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立質(zhì)量控制程序(即,用于測(cè)試媒體,以確保所使用媒體的質(zhì)量符合相關(guān)測(cè)試要求。
實(shí)驗(yàn)室制備或商品化的成品培養(yǎng)基的質(zhì)量取決于其制備過(guò)程,使用不適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)或復(fù)蘇,從而影響檢測(cè)結(jié)果的可靠性。
制備的培養(yǎng)基應(yīng)定期檢測(cè),以進(jìn)行質(zhì)量控制。實(shí)驗(yàn)室制備的培養(yǎng)基的常規(guī)監(jiān)測(cè)包括pH值、適宜性試驗(yàn)和定期穩(wěn)定性試驗(yàn),以確定有效期。介質(zhì)質(zhì)量應(yīng)在有效期內(nèi)根據(jù)適宜性試驗(yàn)確定。有效期的長(zhǎng)短將取決于在一定的儲(chǔ)存條件下介質(zhì)組成的穩(wěn)定性,包括容器的特性和密封性。
在實(shí)驗(yàn)室中,如果采用身份驗(yàn)證培養(yǎng)基的制備和制備和滅菌程序控制過(guò)程,所以同樣的脫水培養(yǎng)基的適用性可以檢查只測(cè)試一次,測(cè)試菌株可以根據(jù)的目的進(jìn)行選擇培養(yǎng)基從相關(guān)的附件,也可以增加生產(chǎn)環(huán)境的污染和產(chǎn)品常見(jiàn)的菌株。如果干粉介質(zhì)的質(zhì)量控制試驗(yàn)不符合要求,應(yīng)找出不合格的原因,防止問(wèn)題再次發(fā)生。不符合要求的介質(zhì)不得使用。
環(huán)境監(jiān)測(cè)使用的介質(zhì)應(yīng)當(dāng)特別保護(hù)。用于關(guān)鍵區(qū)域監(jiān)測(cè)的介質(zhì)應(yīng)雙重包裝并消毒。如不能使用絕育培養(yǎng)基,應(yīng)在使用前進(jìn)行100%預(yù)培養(yǎng),防止外來(lái)污染物進(jìn)入環(huán)境,避免假陽(yáng)性結(jié)果。