簡要描述:人早幼粒急性白血病細(xì)胞HL-60產(chǎn)品性能該細(xì)胞由Collins SJ從一位患有急性早幼粒細(xì)胞性白血病的36歲白人女性的外周血中分離建立;可自發(fā)分化,或在丁酸鹽、次黃嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(1% to 1.5%)、放線菌素D和視黃酸的刺激下發(fā)生分化;PMA刺激后可分泌TNF-α。該細(xì)胞具有吞噬活性和趨化反應(yīng),癌基因myc陽性,表達(dá)補(bǔ)體受體和FcR。
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人早幼粒急性白血病細(xì)胞HL-60產(chǎn)品性能
該細(xì)胞由Collins SJ從一位患有急性早幼粒細(xì)胞性白血病的36歲白人女性的外周血中分離建立;可自發(fā)分化,或在丁酸鹽、次黃嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(1% to 1.5%)、放線菌素D和視黃酸的刺激下發(fā)生分化;PMA刺激后可分泌TNF-α。該細(xì)胞具有吞噬活性和趨化反應(yīng),癌基因myc陽性,表達(dá)補(bǔ)體受體和FcR。
人早幼粒急性白血病細(xì)胞HL-60產(chǎn)品性能
1. 接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變?nèi)嗽缬琢<毙园籽〖?xì)胞HL-60產(chǎn)品性能復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
中國倉鼠肺細(xì)胞英文名稱:CHL
Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
大鼠胃粘膜上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠子宮平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人脈絡(luò)膜微血管細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
小鼠骨髓瘤淋巴細(xì)胞英文名稱:N-H
MLTC-1(小鼠睪間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
NZCYM瓊脂/NZCYM AgarBR100克國產(chǎn)/進(jìn)口
Hep 3B(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)重組蛋白英文名稱:Recombinant Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 3 (TIMP3)
人早幼粒急性白血病細(xì)胞HL-60產(chǎn)品性能大鼠S100B蛋白(S-100B)ELISA Kit,48T/96T
兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA Kit,48T/96T
大鼠S100蛋白(S-100)ELISA Kit,48T/96T
人S100蛋白(S-100)ELISA Kit,48T/96T
小鼠S100蛋白(S-100)ELISA Kit,48T/96T
兔子S100蛋白(S-100)ELISA Kit,48T/96T
人可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA Kit,48T/96T
豬可溶性P選擇素(sP-Selectin)ELISA Kit,48T/96T
小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA Kit,48T/96T
使用權(quán)限 A類注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件;建議直接購買提供的*培養(yǎng)基。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通交流。
培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代,不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
2)公司細(xì)胞資源中心承諾盡zui大努力對(duì)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準(zhǔn)確性。
3)從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí),僅供參考。
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
2. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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