簡要描述:小鼠神經(jīng)干細胞C17.2科研說明書生長特性:貼壁,懸浮,半懸浮半貼壁培養(yǎng)條件:640+10%FBS+1%雙抗溫度:37℃空氣條件:5% CO2,,95% AIR傳代方法:1:2傳代,2~3天換液凍存條件:90%FBS+10%DMSO
詳細介紹
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小鼠神經(jīng)干細胞C17.2科研說明書
生長特性:貼壁,懸浮,半懸浮半貼壁
培養(yǎng)條件:640+10%FBS+1%雙抗
溫度:37℃
空氣條件:5% CO2,,95% AIR
傳代方法:1:2傳代,2~3天換液
凍存條件:90%FBS+10%DMSO
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細胞方式:
(1)干冰運輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;
(2)存活細胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
細胞培養(yǎng)詳細步驟
收到常溫細胞后處理方法
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài).
3. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,貼壁特性(貼壁/懸?。毎螒B(tài),所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基.血清比例,所需細胞因子,傳代比例,換液頻率等.
4. 靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,記錄細胞生長狀態(tài).
5. 貼壁細:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代,若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ML左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松.
6. 懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ML無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打.重懸.鏡檢時,基細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作.
方 式: 詳詢經(jīng)理
小鼠神經(jīng)干細胞C17.2科研說明書
內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件;建議直接購買提供的*培養(yǎng)基。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通交流。
培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實現(xiàn)為科學(xué)研究提供實驗細胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡zui大努力對實驗細胞資源相關(guān)信息進行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
注意事項:
1. 收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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