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巴氏芽孢桿菌（Bacilluspasteurii）產(chǎn)脲酶，尿素酰胺水解酶,近來(lái)受到很多研究人員追捧,那如何培養(yǎng)這菌株成了很多大家關(guān)注的問(wèn)題,下面就一一詳細(xì)介紹巴氏芽孢桿菌如何培養(yǎng)說(shuō)明巴氏芽孢桿菌培養(yǎng)溫度:30℃培養(yǎng)時(shí)間:18-24小時(shí)培養(yǎng)基:.CASOAGAR+尿素（20克/升）酪蛋白胨15克大豆蛋白胨5克氯化鈉5克瓊脂20克蒸餾水1升PH7.3斜面菌種和凍干菌種應(yīng)在2-8℃保存。凍干活化,干粉要全部用完,不能保留,用0.1-0.2ml的培養(yǎng)液或者無(wú)菌水溶解，接種在2支斜面上...

在整個(gè)PCR體系中，引物占有十分重要的地位。PCR的特異性要求引物與靶DNA特異結(jié)合，不與其他非目的的DNA結(jié)合，PCR的靈敏性要求DNA聚合酶能與引物進(jìn)行有效的延伸，可見(jiàn)引物設(shè)計(jì)好壞與PCR結(jié)果密切相關(guān)。一、PCR引物設(shè)計(jì)原則1、引物長(zhǎng)度一般在15-30bp引物長(zhǎng)度一般為15-30bp，常用的為18-27bp，但不應(yīng)大于38bp，因?yàn)檫^(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致其延伸溫度大于74℃，不適于TaqDNA聚合酶進(jìn)行反應(yīng)；2、引物GC含量一般為40%-60%引物GC含量一般為40%-60%，以45...

流式結(jié)果圖有4種類型，分別為:1.直方圖2.散點(diǎn)圖3.等高線圖4.密度圖下面一一為大家介紹1.直方圖（Histograms）a.橫坐標(biāo)代表熒光信號(hào)或散射光信號(hào)相對(duì)強(qiáng)度，可以是線性或?qū)?shù)坐標(biāo)。b.縱坐標(biāo)一般是相對(duì)細(xì)胞數(shù)。直方圖適用于分析處理周期（如下圖）直方圖分析數(shù)據(jù)注意事項(xiàng)：①不能比較不同標(biāo)記之間的表達(dá)量。如一號(hào)樣本單標(biāo)記CD133、二號(hào)樣本單標(biāo)記CD44，那么CD133與CD44表達(dá)量不能用直方圖進(jìn)行比較。②直方圖的形狀（直方圖的高度及寬度）取決于儀器的類型、處理軟件和樣本...

ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給同行帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。下面分析ELISA試劑盒操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法。目前用于紡織退漿的淀粉酶主要ELISA試劑盒，淀粉糖化酶（β-淀粉酶），胰淀粉酶，麥芽淀粉酶等。我國(guó)主要采用耐熱性強(qiáng)的枯草桿菌淀粉酶即α-淀粉酶（枯草桿菌），β淀...

一、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要注意的問(wèn)題①蛋白樣品的提取及蛋白含量的檢測(cè)蛋白樣品的提取咱們*是按照試劑盒說(shuō)明書(shū)來(lái)做的，步驟沒(méi)有什么講的，但是因?yàn)榈鞍讟悠返暮脡闹苯記Q定了是否能做出來(lái)蛋白條帶，這就好比蓋房子所需要的磚頭一樣，一定要?jiǎng)?wù)必認(rèn)真。②儀器準(zhǔn)備清洗玻璃板：玻璃板的正確拿法應(yīng)該是拿住玻璃板的左右兩側(cè)不要用手拿上下兩端，避免手套上面的臟東西順著水流流到玻璃板上，玻璃板請(qǐng)一定務(wù)必清洗干凈，不干凈的玻璃板上面的殘留物可能會(huì)影響凝膠之間的化學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致膠出現(xiàn)問(wèn)題，對(duì)后面的結(jié)果影響很大。玻璃板放...

軟瓊脂(softagar)實(shí)驗(yàn)一般用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞的集落形成能力?，F(xiàn)在這種方法越來(lái)越多的用于分離癌細(xì)胞，也可以用來(lái)確認(rèn)癌細(xì)胞是否具有癌化特性，為進(jìn)一步做腫瘤小鼠移植模型奠定理論基礎(chǔ)。該方法看似簡(jiǎn)單，但如果細(xì)節(jié)掌握不好，往往導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或數(shù)據(jù)缺乏說(shuō)服力。如果你曾經(jīng)在這個(gè)實(shí)驗(yàn)上栽了跟頭，請(qǐng)不妨在如下幾個(gè)方面進(jìn)行嘗試：1.要確保在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所使用的瓊脂處于*液體狀態(tài)（80℃），尤其是在做基底時(shí)，如果瓊脂凝固過(guò)快會(huì)導(dǎo)致基底不均一；2.做瓊脂基底是應(yīng)避免產(chǎn)生小氣泡，一旦有小氣泡產(chǎn)生，應(yīng)...

剛復(fù)蘇的細(xì)胞狀態(tài)不好，有許多死細(xì)胞，頻繁換液好嗎？大致如題，有一些人認(rèn)為細(xì)胞剛復(fù)蘇不能狗頻繁的換液，說(shuō)是細(xì)胞會(huì)自己分泌細(xì)胞因子維持自己的生存，換液的話，就會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)，長(zhǎng)的不好，但是我的細(xì)胞狀態(tài)不好而且有很多細(xì)胞碎片，細(xì)胞死亡之后在培養(yǎng)基中會(huì)不會(huì)釋放很多的有毒物質(zhì)，對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)不利，所以就想要換液把死細(xì)胞和細(xì)胞碎片都洗掉，目前不知道怎么選擇，所以想請(qǐng)大家給一下就參考意見(jiàn)？能洗掉的就洗，洗不掉的也不用刻意的用力吹，正如你所說(shuō)的細(xì)胞密度小，可能會(huì)損害細(xì)胞。換液的話還是2~3天...

基礎(chǔ)篇-無(wú)菌操作基本技術(shù)1.實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，無(wú)菌室及無(wú)菌操作臺(tái)(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面，并開(kāi)啟無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后，才開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái)，以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無(wú)菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后，再進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株之操作。2.無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物...