4-23
溶葡球菌酶(lysozyme)又稱胞壁質(zhì)酶(muramidase)或N-乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶(N-acetylmuramideglycanohydrlase),是一種能水解致病菌中黏多糖的堿性酶。主要通過(guò)破壞細(xì)胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之間的β-1,4糖苷鍵,使細(xì)胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽,導(dǎo)致細(xì)胞壁破裂內(nèi)容物逸出而使細(xì)菌溶解。溶菌酶還可與帶負(fù)電荷的病毒蛋白直接結(jié)合,與DNA、RNA、脫輔基蛋白形成復(fù)鹽,使病毒失活。因此,該酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。...
4-3
RNA甲基化(RNAmethylation)是一類表觀遺傳修飾,在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的超過(guò)100種不同的RNA化學(xué)修飾中,主要有6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)、5-甲基胞嘧啶(C5-methylcytidine,m5C)和1-甲基腺嘌呤(N1-methyladenosine,m1A)。RNA甲基化在調(diào)控基因表達(dá)、編輯、穩(wěn)定性及降解等方面扮演重要角色。早在20世紀(jì)70年代,人們已經(jīng)在真核生物的mRNA和lncRNA中發(fā)現(xiàn)了m6A修飾。但受制于技術(shù)的局限性,...
3-18
慢病毒包裝簡(jiǎn)要程序:以六孔板中的1孔為例,每個(gè)樣品需要1×10∧6個(gè)293FT細(xì)胞。1、取1.5ml滅菌EP管,加入1.5μg包裝混合質(zhì)粒和0.5μg表達(dá)質(zhì)粒以及250μl的無(wú)血清OptiMEM。輕柔混勻,室溫孵育5min。2、取1.5ml滅菌EP管,取9μl脂質(zhì)體2000l溶于250μl無(wú)血清Opti-MEMI培養(yǎng)基中。輕柔混勻,室溫孵育5min。3、將DNA溶液和脂質(zhì)體溶液輕柔混勻。室溫孵育20min4、用胰酶消化并記數(shù)293FT細(xì)胞。用含血清的DMEM培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。5...
2-20
一、自噬誘導(dǎo)劑(1)BredeldinA/Thapsigargin/Tunicamycin:模擬內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(2)Carbamazepine/L-690,330/LithiumChloride(氯化鋰):IMPase抑制劑(即Inositolmonophosphatase,肌醇單磷酸酶)(3)Earle's平衡鹽溶液:制造饑餓(4)N-Acetyl-D-sphingosine(C2-ceramide):ClassIPI3KPathway抑制劑(5)Rapamycin:mTOR抑...
1-8
巴氏芽孢桿菌在水產(chǎn)上也算是用得比較多了,能夠肥水、凈水、降解氨氮、亞鹽等有害物質(zhì)。這些芽孢的作用大家都清楚,水質(zhì)惡化、底質(zhì)惡化等都能使用芽孢來(lái)改善,可是你知道為什么這小小的細(xì)菌,卻有這么大的用途嗎?其實(shí)上面這些用途都是芽孢的一個(gè)能力引申出來(lái)的——分解。先說(shuō)肥水,為什么芽孢能肥水?細(xì)菌也會(huì)在塘里生長(zhǎng),不會(huì)搶奪藻類的營(yíng)養(yǎng)嗎?首先藻類是不能直接利用有機(jī)物的,像殘餌、糞便、尸體等都無(wú)法成為藻類生長(zhǎng)的助力,而芽孢會(huì)將有機(jī)質(zhì)分解為無(wú)機(jī)物,這樣植物就能直接利用這些營(yíng)養(yǎng)成分了,從而達(dá)到肥水的...
12-27
細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染情況總結(jié)如下:常見的污染如下:1、細(xì)菌:細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,根據(jù)感染細(xì)菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁變黃,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響明顯。仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時(shí)放氣時(shí)間足夠,壓力足夠!尤其是和儲(chǔ)存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲(chǔ)存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理2、霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無(wú)雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮...
12-18
常見菌類污染情況圖片1.桿菌常見的有大腸桿菌,長(zhǎng)度通常在2-5um左右。2.球菌常見的有葡萄球菌,直徑通常在1-2um左右。3.霉菌常見的有毛霉,菌絲寬2-10um左右,長(zhǎng)度短則幾十um,長(zhǎng)則可達(dá)幾mm。以上3種是細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中常見的菌類污染,其共性是增殖快,適應(yīng)能力強(qiáng),很難*,一般如果確認(rèn)培養(yǎng)細(xì)胞有以上污染,建議盡快丟棄,并檢查相關(guān)試劑和培養(yǎng)箱是否有污染,確認(rèn)沒(méi)有后再重新復(fù)蘇。那么細(xì)胞如果還是不幸污染了,那又該怎么辦呢?我把細(xì)胞污染分為早期和晚期兩種。早期污染是細(xì)胞狀態(tài)變差...
12-11
ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給同行帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。實(shí)驗(yàn)顯示,ELISA試劑盒經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或*沒(méi)有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,沉淀物...
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